RESUMO
Os objetivos deste trabalho foram: desenvolver um protocolo de desinfestação superficial de sementes, selecionar uma metodologia de germinação in vitro, avaliar o potencial de regeneração no cultivo in vitro e a influência do tempo de cultivo no tipo de calo formado e na regeneração a partir de calos de calêndula. Para a desinfestação superficial, foram testados diferentes tempos de imersão em solução de hipoclorito de sódio a 2,5 por cento. Na germinação in vitro, foram testados: imersão em ácido sulfúrico absoluto; imersão em ácido clorídrico absoluto; retirada do tegumento e embebição das sementes; e embebição das sementes sem a retirada do tegumento. Para avaliar o potencial de regeneração in vitro, foram testadas diferentes concentrações de 6-benzilaminopurina (BAP) e ácido alfa-naftaleno acético (ANA) e tempos de cultivo. A imersão em solução de hipoclorito de sódio a 2,5 por cento por 30 minutos aliada à remoção do tegumento promove a germinação in vitro de sementes de calêndula, efetuando uma desinfestação superficial satisfatória. Para a regeneração de partes aéreas e raízes a partir de sementes de calêndula não é necessária a suplementação com fitorreguladores. Na presença de BAP, independentemente da presença ou não de ANA, calos primários induzem à formação de calos esponjosos e friáveis e de calos verdes e rígidos, estes em menor número; na ausência de BAP é induzida a formação de calos pequenos. Calos jovens são mais eficientes em regenerar partes aéreas em calêndula.
The aims of this paper were: to develop a protocol of superficial disinfestation of marigold seeds; to select a methodology of germination in vitro of marigold seeds; to evaluate the potential regeneration of in vitro culture of marigold; and the influence of in vitro culture time in the kind of callus formed. The superficial disinfestation was perfomed by different times of immersion in 2.5 percent sodium hypoclorite solution. The methodology was tested by immersion in sulfuric acid; immersion in chloridric acid; removal of tegument and soaking of seeds; and just seeds soaking. To evaluate the potential of in vitro regeneration were tested different concentrations of growth regulators and culture times. The immersion in 2.5 percent sodium hypochlorite solutions for 30min coupled with the removal of tegument promote the in vitro germination and superficial disinfestation of marigold seeds satisfactorily. Primary calli in BAP presence, with or without ANA, induce formation of spongy and friable calli and of green and hard calli, these are in least amount. Young calli are more efficient to regenerate aerial parts.
RESUMO
Os objetivos deste trabalho foram avaliar o suprimento hídrico fornecido por diferentes substratos alternativos e analisar sua eficiência na sanidade e na germinação in vitro de sementes de Pinus taeda L. Sementes foram inoculadas em papel filtro, algodão hidrófilo e meio ágar-água. Foi avaliada a absorção de água pelas sementes por três, seis, nove, 24, 48 e 72 horas. Posteriormente, aos 21 dias de cultivo, foi determinada a contaminação por microrganismos. A absorção de água, com base no aumento percentual que ocorreu na massa das sementes, foi superior em papel filtro e algodão hidrófilo. Os melhores percentuais de germinação foram obtidos com papel filtro e ágar-água. Contudo, este último apresentou as maiores taxas de contaminação. Devido à perda de água no substrato papel filtro no decorrer do tempo, recomenda-se o uso de algodão hidrófilo em função dos baixos índices de contaminação observados.
The aim of this study was to assess the water supply provided by different alternative substrates as well as to analyze its efficiency in the sanity and in the in vitro germination of Pinus taeda L. seeds. The seeds were inoculated in filter paper, hydrophile cotton and agar-water medium. Water absorption by seeds was assessed for 3, 6, 9, 24, 48 and 72h and, later, at 21 days of cultivation and contamination by microorganisms was determined. Water absorption, based on the percentage increase which occurred in the weight of seeds, was higher in filter paper and hydrophile cotton. The best germination rates were obtained with filter paper and agar-water. However, agar-water presented the highest contamination rates. Due to water loss in the substrate filter-paper during cultivation, it is suggested the use of cotton because of the low contamination rates observed.
